稀土离子配合物
时间分辨荧光微球作为一种特殊的功能微球,是一种内部包埋有稀土离子配合物的聚苯乙烯微球,内部包埋的稀土离子一般有Eu3+、Tb3+、Sm3+和Dy3+,其在与某些配体如β-二酮类及芳香胺类形成配合物后,可吸收紫外光,然后发出很强的稀土离子特征荧光。
时间分辨荧光微球的优势,也正来源于其内部包埋工艺和荧光染料(稀土离子配合物)的特点。
>>> 内部包埋工艺 <<<
时间分辨荧光微球内部包埋荧光染料,这种工艺可以有效的防止荧光染料的泄露,确保在与生物分子偶联时具有最佳的表面活性。
每个微球内部包埋了无数个荧光分子,有效地提高了荧光强度和分析的灵敏度。
>>> 稀土离子配合物 <<<
由于稀土离子本身发光效率低,稀土离子与具有高吸收光系数的配体构成配合物后,配体吸收激光跃迁至激发态将能量传递给稀土离子,当稀土离子接受传递来的能量后被激发至共振能级,并在共振能级跃迁回基态过程中发出荧光,表现为很强的稀土离子特征荧光。
▲ 稀土离子配合物发光机理
(S0为配体的基态,S1为配体最低激发单重态,T1为配体激发态,En为稀土离子激发态)
基于上述微球结构与发光机理,时间分辨荧光微球相比于普通荧光微球具有以下特点:
• 内部包埋工艺
--无染料表面,便于偶联
• 荧光强度
--较普通的红色或绿色荧光微球来讲荧光强度更高
• Stokes位移
--较普通荧光微球要大(大部分在250nm以上)
• 半衰期
--荧光寿命长,抗干扰能力强
(时间分辨荧光寿命通常在100μs以上,较普通荧光微球的荧光寿命高出几个数量级,这是由于稀土配合物的发光是经过配体激发态能量转移所致)
• 稳定性
--稀土离子配合物的稳定性较普通荧光高,批间差异更稳定
目前,最常见的时间分辨荧光微球内部包埋稀土元素铕(Eu),POCT主要应用于个人健康管理、临床应用、传染病和重大疫情检测、现场执法检测(如酒精检测、毒品检测、法医毒理检测)、食品安全检测等的荧光定量免疫层析试纸条产品的开发,结合荧光定量检测仪可以实现不同指标的快速定量检测。